多聚甲醛和甲醛固定液以及中性福尔马林固定液如何来选择?发表时间:2022-05-14 11:26 实验当中,很多实验需要用到固定液,比如流式 细胞爬片ICC IF 组织切片冰冻荧光染色 以及石蜡 切片 IHC IF 以及病理HE染色等,下面就多聚甲醛 福尔马林 甲醛 这 三个代表性的名字以及衍生出来的固定液,来做一个简单的经验分享: 甲醛是一种无色,强烈气味的刺激性气体,比空气重,可溶于水,其35%--40%的水溶液被称为福尔马林,再加入10%-15的甲醇防止多聚化,否则甲醛会多聚形成多聚甲醛PFA。多聚甲醛式N=80100的低分子量聚合物。其产物为白色固体(粉末或者颗粒状),不溶于乙醇 乙醚 和丙酮,溶于氢氧化钠 等碱性溶液以及 低浓度酸液当中。在加热情况下,会慢慢释放甲醛。平常 为了固定,需要用PBS将甲醛溶液稀释到0.5%-4%。10%中性福尔马林,实际就是4%有效成分的甲醛(含40%甲醛的福尔马林稀释10倍,然后 调PH值到偏弱碱性)。甲醛放置过久会慢慢酸化 形成甲酸 ,所以用偏碱性的 固定液,会有效防止这个情况发生(在保质期内)。基于以上的内容,这里纠正一下一个常识性的错误:大家都认市面上买的4%多聚甲醛固定液是 多聚甲醛起着 固定作用,实际上,多聚甲醛式一种不能溶解的白色固体物质,没法直接用来固定任何样本,我们平时所谓的多聚甲醛溶液,其本质都是通过加热方法获得的不含甲醇的甲醛溶液,其有效成为为甲醛! |